الوقود الحيوي المستخدمة في محركات الاشتعال ضغط (الديزل) التي تحتوي على استرات أحادية الألكيل من الأحماض الدهنية طويلة السلسلة تم إنشاؤها بواسطة ترانسيستيريفيينج الزيوت النباتية أو الحيوانية مع بسيطة الكحول (الميثانول عادة لكن الإيثانول في بعض الأحيان) وعامل حفاز. كما يمكن إنتاج محركات الوقود الأحيائي لوقود الديزل من الكتلة الحيوية الليجنوسليولوزيه باستخدام التغويز والتوليف، وانحلال حراري أو تسييل الحرارية المائية؛ ومع ذلك، ينطبق مصطلح 'وقود الديزل الحيوي' عادة فقط للوقود تلك المستمدة من المصادر المتجددة من الدهن. غالباً ما تنتج من زيت فول الصويا. المواد الخام الأخرى تشمل زيت بذور اللفت، زيت النخيل.